Methilene Blue Reduction Test (MBRT)

Apa itu MBRT (Methylene Blue Reduction Test) ?

      Merupakan metode yang sangat berguna untuk penentuan mutu secara kasar. Hal ini disebabkan metode ini dapat dilakukan dengan cepat, mudah dan murah terutama bila contoh yang diamati dalam jumlah yang banyak

Prinsip Kerja MBRT

     Apabila dimasukkan methil biru dimasukkan ke dalam biakan bakteri, dapat berfungsi sebagai indikator yang dapat mereduksi. Pewarna yang ditambahkan lama kelamaan akan menghilang sesuai dengan banyaknya mikroba didalam sampel. Methil biru ini apabila direduksi akan berubah menjadi bentuk leuko dan apabila leuko dioksidasi akan kembali menjadi berwarna biru. Kecepatan hilangnya warna biru menunjukkan kecepatan tereduksinya methilen biru, dan hal ini tergantung pada aktifitas dan jumlah bakteri yang terkandug dalam bahan. Dengan melihat kecepatan hilangnya warna biru tersebut, maka dapat diperkirakan jumlah mikroba yang terdapat dalam bahan

Hilangnya biru methilene pada sampel

1.     Penghapusan oksigen terlarut oleh bakteri

2.    Aktifitas pengurangan pewarna oleh konstituen dari sampel

Prosedur Kerja MBRT

1.     Mengambil tiap contoh sampel sebanyak 9 ml dan memasukkannya ke dalam tabung reaksi yang sudah disterilkan. Untuk tiap sampel digunakan pipet steril dan dibuat tiga ulangan(triplo)

2.    Menambahkan 1 ml larutan methil biru 1:200.000 pada masing-masing tabung

3.    Menyumbat rapat-rapat dan mengocok agar homogen

4.    Meletakkan tabung-tabung tersebut dalam penangas air  yang suhunya 37^o C selama 5 menit

5.    Mengambil tabung-tabung tersebut dan menginkubasikan pada suhu 37^o C

6.    Mengamati adannya reduksi terhadap methile blue setiap setengah jam

7.    Reduksi dianggap selesai apabila 4/5 bagian contoh bahan cair menjadi tidak berwarna

Klasifikasi Hasil Pengujian MBRT

   1.     Kualitas sampel bermutu baik: warna indikator tidak hilang dalam waktu 5½ jam, mengandung ±0,5 juta bakteri tiap ml contoh

   2.    Kualitas sampel bermutu sedang: warna indikator hilang antara 2 sampai 5½ jam, mengandung 4 juta bakteri tiap ml contoh

   3.    Kualitas sampel bermutu jelek: warna indikator hilang antara 20 menit sampai 2 jam, mengandung 4 sampai 20 juta bakteri tiap ml contoh

   4.    Kualitas sampel sangat jelek: warna indikator hilang sebelum 20 menit, mengandung bakteri lebih dari 20 juta tiap ml sampel

Faktor factor MBRT

    a.    Kandungan Oksigen

    b.    Jenis Organisme

    c.    Supply Cahaya

Apa sebenarnya methilENE blue itu?

     Merupakan aromatik heterosiklik (C₁₆H₁₈N₃SCl) yang merupakan pewarna thiazine yang kerap digunakan sebagai bakterisida dan fungisida.

Pada suhu kamar akan berbentuk bubuk, padat, tidak hijau tua. Dan warna biru ketika diarutkan dalam air

Daftar Pustaka

• http://www.google.com/imgres?um=1&hl=id&client=firefox-a&tbo=d&rls=org.mozilla:en-US:official&biw=1024&bih=629&tbm=isch&tbnid=DEw9EMEVRLS1_M:&imgrefurl=http://en.wikipedia.org/wiki/Methylene_blue&docid=Ycq4cxT_aoimzM&imgurl=http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/a/a9/Reflections_in_a_flask_of_Methylene_Blue.jpg/220px-Reflections_in_a_flask_of_Methylene_Blue.jpg&w=220&h=293&ei=pBwfUajmC9GzrAeDtICQBw&zoom=1&iact=rc&dur=3&sig=114251493404145515994&page=1&tbnh=168&tbnw=141&start=0&ndsp=13&ved=1t:429,r:0,s:0&tx=108&ty=312